Лигирование синтетических олигонуклеотидных зондов

Таким же преимуществом обладают и методы детекции мутаций, основанные на лигировании синтетических олигонуклеотидных зондов — OLA (oligonucleotide ligation assay) [559]. ДНК-зонды для лигирования подбирают таким образом, чтобы они были полностью комплементарны нормальному фрагменту ДНК в области локализации мутации, причем сама нуклеотидная замена должна находиться на сты­ке двух праймеров.

из термофильных микроорганизмов. При наличии мутации в тестиру­емой молекуле ДНК на конце одного из зондов образуется сайт неком­плементарного спаривания, непосредственно примыкающий к месту лигирования. Сшивки между зондами в этом случае не происходит. Метод включает несколько последовательных циклов гибридизации, лигирования и денатурации. В дальнейшем проводят электрофорети­ческий анализ меченых однонитевых фрагментов ДНК.