<<
>>

Лигирование синтетических олигонуклеотидных зондов

Таким же преимуществом обладают и методы детекции мутаций, основанные на лигировании синтетических олигонуклеотидных зондов — OLA (oligonucleotide ligation assay) [559]. ДНК-зонды для лигирования подбирают таким образом, чтобы они были полностью комплементарны нормальному фрагменту ДНК в области локализации мутации, причем сама нуклеотидная замена должна находиться на сты­ке двух праймеров.

После гибридизации синтезированные олигонук­леотидные последовательности сшивают ДНК-лигазами, выделенными

из термофильных микроорганизмов. При наличии мутации в тестиру­емой молекуле ДНК на конце одного из зондов образуется сайт неком­плементарного спаривания, непосредственно примыкающий к месту лигирования. Сшивки между зондами в этом случае не происходит. Метод включает несколько последовательных циклов гибридизации, лигирования и денатурации. В дальнейшем проводят электрофорети­ческий анализ меченых однонитевых фрагментов ДНК.

<< | >>
Источник: БарановВ.С.. Генетический паспорт — основа индивидуальной и предик­тивной медицины / Под ред. В. С. Баранова. — СПб.: Изд-во Н-Л,2009. — 528 с.: ил.. 2009

Еще по теме Лигирование синтетических олигонуклеотидных зондов:

  1. Энтеральное (зондовое) питание
  2. СИНТЕТИЧЕСКИЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ СРЕДСТВА
  3. Синтетические препараты
  4. Синтетические противодиабетические средства
  5. Синтетический учет труда и заработной платы
  6. СИНТЕТИЧЕСКИЕ ПРОТИВОГРИБКОВЫЕ СРЕДСТВА
  7. Витамин К (синтетический фитоменадион)
  8. Гормональные средства и их синтетические аналоги
  9. ПРЕПАРАТЫ ГОРМОНОВ, ИХ СИНТЕТИЧЕСКИХ ЗАМЕНИТЕЛЕЙ И АНТАГОНИСТОВ
  10. Аналитический и синтетический учет движения материалов
  11. Препараты половых гормонов, их синтетических заменителей и антагонистов
  12. Препараты гормонов коры надпочечников, их синтетических заменителей и антагонистов
  13. Альтернативные ПЦР-методы амплификации нуклеиновых кислот
  14. Области применения
  15. ТЮБАЖ
  16. Глава 13 Амфениколы
  17. Эндоскопия
  18. Инфузионная терапия и питание