Амплификация рефрактерной мутационной системы

Концептуально близким к этому варианту является метод «амп­лификации рефрактерной мутационной системы» — amplification refractory mutation system — ARMS [255, 385]. Суть метода заключа­ется в параллельной постановке двух ПЦР, для каждой из которых одним из праймеров служит аллель-специфическая мутантная или нормальная олигонуклеотидная последовательность соответственно (рис.

Рис. 4.4. Принцип метода ARMS (amplification refractory mutation system) — амп­лификации рефрактерной мутационной системы (пояснения в тексте)

же олигонуклеотидную последовательность, так что в обоих случаях могут амплифицироваться участки ДНК одинаковой протяженности. При наличии мутации в исследуемой ДНК амплифицированные фраг­менты образуются только в том случае, если в качестве аллель-специ- фического праймера выбирается мутантная последовательность, тогда как при использовании нормального олигонуклеотидного праймера ПЦР блокируется. Метод нашел широкое применение для детекции мутаций при фенилкетонурии, бета-талассемии, муковисцидозе, при типировании генов HLA системы. Однако сложности в подборе прай­меров и в выборе оптимального режима ПЦР ограничивают широкое применение этого метода. Его несомненным преимуществом является возможность применения полностью автоматического сканирования.